ANALISA KADAR PROTEIN

 Tujuan :

Untuk pengukuran/penetapan kadar protein dalam bahan hasil pertanian dan hasil olahannya/pangan

 Prinsip :

Pada prinsipnya kadar protein ditetapkan sebagai jumlah total Nitrogen setelah dilakukan proses destruksi dengan Asam Sulfat (H₂SO₄) pekat membentuk Ammonium Sulfat (NH₄)₂SO₄ x Faktor Konversi (6,25).

Dasar Analisa :

Dasar Analisa kadar prrotein ada 4 langkah, sebagai berikut :

1.      Destruksi

2.      Destilasi

3.      Tetrasi

4.      Perhitungan

Tahap 1

(Destruksi)

Tujuan : untuk merusak/mencerna struktur komponen protein dan semua komponen organik menjadi bagian-bagian yang amat sederhana(dalam bentuk gas) dengan Asam Sulfat pekat (H₂SO₄) 98%

Untuk meningkatkan titik didih guna mempercepat proses destruksi perlu ditambahkan katalisator Selen (K₂SO₄ + CuSO₄ )

Destruksi dapat di akhiri, apabila sampel telah tampak bening.

Reaksi yang terjadi selama proses Destruksi

       H                 H₂SO₄                                                                                                               

·         R—C—COOH              R-H, H₂O, CO, CO₂, SO₂, SO₃, NH₃

     NH₂

·         2NH₃ + H₂SO₄              (NH₄)₂SO₄.............................Cu⁺²

Tahap 2

(Destilasi)

Sampel hasil Destruksi dalam bentuk senyawa Ammonium Sulfat (NH₄)₂so₄ , sebelum di destilasi ditambha larutan NaOH 45% sampai basa/alkalis, dengan ditandai terbentuknya endapan hitam, selanjutnya sampel di destilasi dan gas yang dihasilkan di tangkap dengan larutan Asam Chlorida 0,1 N (Makro Kjeldal) dan untuk Mikro Kjeldal pakai Asam Borat 0,1 N (H₃BO₃)

Reaksi yang terjadi selama proses Destilasi adalah sebagai berikut :

·         2Cu⁺² + 2NaOH                   Cu(OH)₂

                                        H₂O            CuO

·         (NH₄)₂SO₄ + 2 NaOH                 Na₂SO₄ + 2NH₄OH

                                                                H₂O            NH₃

·         NH₃ + HCL                NH₄CL (Makro)

·         3NH₃ + H₃BO₃                  (NH₄)₃BO₃ (Mikro)

Tahap 3

(Tetrasi)

Tujuan : menetapkan sisa HCL 0,1N pada saat destilasi (Makro) dan untuk Mikro adalah menetapkan garam Ammonium Borat (NH₄)₃BO₃ yang terbentuk.

Destilat hasil destilasi dilakukan tetrasi menggunakan NaOH 0,1 N dengan indikator BCP (Makro) dan untuk Mikro di tetrasi menggunakan  HCL 0,1N dengan indikator BCP.

Tetrasi dapat di akhiri dengan terjadinya perubahan warna dari Kuning ke Violet (Makro), Violet ke Kuning (Mikro) (TS)

Dengan cara yang sama dengan perlakuan sampel dilakukan perlakuan blanko tanpa sampe (TB)

·         HCL _(Rest) + NaOH                 NaCL + H₂O (Makro)

·         (NH₄)₃BO₃ + 3HCL                   3NH₄CL + H₃BO₃ (Mikro)

Tahap 4

(Perhitungan)

Makro :

·         %N = (TB-TS) x 0,1 x Ar N x FP x 100

                 Gram sampel x 1000

Mikro :

·         %N = (TS-TB) x 0,1 x Ar N x FP x 100

                 Gram sampel x 1000

·         % Protein = %N x FK

·         Ar N = 14,008

·         FP     = Faktor Pengenceran

·         FK    = Faktor Konversi (6,25) tergantung dari jenis sampel